Gracias por visitar nature.com.Está utilizando una versión de navegador con soporte limitado para CSS.Para obtener la mejor experiencia, le recomendamos que utilice un navegador más actualizado (o desactive el modo de compatibilidad en Internet Explorer).Mientras tanto, para garantizar un soporte continuo, mostramos el sitio sin estilos ni JavaScript.Scientific Reports volumen 12, Número de artículo: 13664 (2022) Citar este artículoLa biodiversidad de parásitos en los cetáceos representa un componente descuidado del ecosistema marino.Este estudio tuvo como objetivo investigar la distribución y diversidad genética de los nematodos anisákidos del género Anisakis muestreados en cetáceos del Océano Atlántico Nororiental y el Mar Mediterráneo.Un total de 478 adultos y pre-adultos de Anisakis spp.fue identificado mediante un enfoque genético multilocus (mtDNA cox2, EF1 α − 1 nDNA y nas 10 nDNA gene loci) de 11 especies de cetáceos.Se observó un patrón claro de preferencia de hospedante por Anisakis spp.a nivel de familia de cetáceos: A. simplex (ss) y A. pegreffii infectaron principalmente a delfínidos;A. physeteris y A. brevispiculata estaban presentes solo en fisetéridos y A. ziphidarum en zífidos.Se investigó por primera vez el papel de las poblaciones anfitrionas de cetáceos de diferentes aguas en la configuración de la estructura genética de la población de A. simplex (ss), A. pegreffii y A. physeteris.Se encontró una subestructuración genética significativa en las poblaciones de A. simplex (ss) del mar de Noruega y el mar del Norte en comparación con las del Atlántico ibérico, así como en las poblaciones de A. pegreffii de los mares Adriático y Tirreno en comparación con las de las aguas atlánticas ibéricas.Se detectó una homogeneidad genética sustancial en la población del mar Mediterráneo de A. physeteris.Este estudio destaca una fuerte preferencia por algunos Anisakis spp.para ciertas especies o familias de cetáceos.La información sobre la biodiversidad de los anisákidos en sus cetáceos huéspedes definitivos, que son depredadores ápice de los ecosistemas marinos, adquiere especial importancia para las medidas de conservación en el contexto de los fenómenos del cambio climático global.Los nematodos anisákidos del género Anisakis Dujardin, 1845 son parásitos marinos de distribución mundial.Su ciclo de vida es indirecto e involucra a varios huéspedes en diferentes niveles tróficos de las redes alimentarias marinas.La etapa adulta del parásito vive en mamíferos marinos, principalmente cetáceos, mientras que los crustáceos planctónicos o semiplanctónicos actúan como primeros huéspedes intermediarios del parásito, y los peces y calamares representan huéspedes intermedios/paraténicos1,2,3.Concretamente, Anisakis spp.parasitan el tracto digestivo de los cetáceos, encontrándose comúnmente en los estómagos de las ballenas dentadas y barbadas1,3,4,5,6,7.Los huéspedes definitivos adquieren Anisakis a través de la ingestión de crustáceos, peces o calamares infectados.Una vez en el estómago de los huéspedes cetáceos, el tercer estadio larvario (L3) de Anisakis spp.mudan a larvas de cuarta etapa (L4), que luego se convierten en adultos sexualmente maduros, un proceso que toma de 40 a 60 días8,9,10.Los estadios adultos de Anisakis “nadan” en la ingesta, probablemente alimentándose de ellos9.En muchos casos se adhieren a la mucosa del estómago formando racimos y en ocasiones generando úlceras granulomatosas gástricas11,12,13,14,15.La aplicación de metodologías genéticas/moleculares a las morfoespecies de Anisakis ha mejorado nuestra comprensión de su sistemática, taxonomía y filogenia, permitiendo la detección y descripción de especies hermanas y el descubrimiento de nuevas especies2,3,16,17,18 y, en general, fomentando nuestra conocimiento de su ecología, distribución geográfica y preferencias de hospedante1,3,19,20,21,22.La existencia de nueve especies nominales de Anisakis como unidades filogenéticas distintas ha sido demostrada por varios análisis filogenéticos, usando genes tanto nucleares como mitocondriales2,3,19,23,24.La PCR-RFLP de la región ITS rDNA24 y la secuenciación del gen mitocondrial mtDNA cox225 se utilizan para identificar todas las especies de Anisakis, tanto en estado larvario como adulto.Recientemente se validaron varios loci de genes nucleares en muestras del complejo sl de A. simplex (es decir, A. pegreffii, A. simplex (ss) y A. berlandi): el análisis de secuencia de la región EF1 α - 1 nDNA reveló dos sitios nucleares de diagnóstico (SNP) en los que los nucleótidos diferían entre A. simplex (ss) y A. pegreffii26;el locus de metalopeptidasa 10 (nas10 nDNA) exhibe SNP de diagnóstico, en los que los nucleótidos difieren entre las tres especies, y para los cuales se desarrollaron ensayos ARMS-PCR27.En los últimos años se han desarrollado paneles de loci de microsatélites de ADN (SSR)17,28, que incluyen algunos loci 100% diagnósticos con alelos alternativos fijos que difieren entre las tres especies17,29,30.Estudios sobre la epidemiología de Anisakis spp.en sus huéspedes intermedios/paraténicos (es decir, peces y calamares) del Océano Atlántico nororiental (NE) y el Mar Mediterráneo son abundantes, y este campo se actualiza regularmente3,31,32,33,34,35.Sin embargo, existen escasos datos epidemiológicos sobre Anisakis spp.en sus huéspedes definitivos (es decir, los cetáceos) y, en consecuencia, se carece de conocimiento sobre su biodiversidad, distribución y ecología en las etapas de preadulto y adulto.Hasta la fecha, las investigaciones sobre parásitos de cetáceos en el Atlántico NE y el Mar Mediterráneo se han basado en muestras de individuos varados3,12,14,15,36,37,38,39 o, más raramente, en muestras obtenidas durante actividades balleneras8.El conocimiento de la biodiversidad (tanto a nivel de especie como de género) de Anisakis en diferentes huéspedes cetáceos tiene implicaciones importantes para la comprensión de la ecología parásito/huésped.El objetivo del presente trabajo fue aplicar un enfoque genético multilocus al estudio de endoparásitos anisákidos de cetáceos de mares europeos, para: (i) evaluar la biodiversidad de especies de Anisakis en su etapa adulta en varios cetáceos huéspedes, de diferentes áreas del NE del Océano Atlántico y el Mar Mediterráneo;(ii) proporcionar información sobre la distribución de las especies de Anisakis en las poblaciones de cetáceos;(iii) analizar la asociación huésped-parásito entre cetáceos huéspedes y sus parásitos Anisakis;(iv) investigar la estructura genética de la población de Anisakis spp.de diferentes hospederos y rangos geográficos.Se obtuvo un total de N = 478 nematodos anisákidos de cetáceos varados y, de acuerdo con sus características morfológicas, todos fueron asignados al género Anisakis.Solo se encontraron especímenes adultos (que muestran estructuras reproductivas desarrolladas, como papilas caudales y espículas en los gusanos machos y ovarios en las hembras) y preadultos (presencia de labios, ausencia de dientes perforantes).No fue posible contar o estimar la carga total de gusanos durante la mayoría de las necropsias de cetáceos, solo para obtener una submuestra de parásitos.Por lo tanto, no pudimos realizar un análisis epidemiológico completo de los parásitos para cada especie huésped.Según el análisis BLAST realizado sobre las 478 secuencias mtDNA cox2 (580 pb) obtenidas, se detectaron cinco especies: A. simplex (ss), A. pegreffii, A. physeteris, A. brevispiculata y A. ziphidarum.El número de especímenes de Anisakis identificados genéticamente en los huéspedes definitivos de diferentes áreas de muestreo se informa en la Tabla 1. Las proporciones relativas de Anisakis spp.en cetáceos en diferentes áreas geográficas del Océano Atlántico NE y el Mar Mediterráneo, y en sus diferentes familias de huéspedes definitivos, se reportan en las Figs.1 y 2, respectivamente.Las proporciones relativas de Anisakis spp.en cetáceos según diferentes zonas geográficas del NE Atlántico y Mar Mediterráneo.El mapa se obtuvo de Wikimedia Commons, sin licencia (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:BlankMap-Europe-v4.png), Roke fue quien cargó no oficialmente el mapa derivado CC BY-SA 3.0.Las proporciones relativas de Anisakis spp.según hospedantes definitivos pertenecientes a especies de las familias Balenopteridae, Delphinidae, Phocoenidae, Physeteridae y Ziphiidae.Los códigos de hospedante se informan por orden alfabético: Ba: Balenoptera acutorostrata, Dd: Delphinus delphis, Gm: Globicephala melas, La: Lagenorhynchus albirostris, Tt: Tursiops truncatus, Sc: Stenella coeruleoalba, Pp: Phocoena phocoena, Pm: Physeter macrocephalus, Ks: Kogia sima, Kb: Kogia breviceps, Zc: Ziphius cavirostris.La ocurrencia simpátrica (en algunos casos incluso sintópica, como en dos especímenes de delfines comunes Delphinus delphis, un delfín listado Stenella coeruleoalba, un delfín nariz de botella Tursiops truncatus y tres marsopas comunes Phocoena phocoena) de 134 especímenes adultos de A. pegreffii y A. simplex (ss) fue registrado en especies de delfines varadas a lo largo de la costa atlántica ibérica (Tabla 1).Estos especímenes también se identificaron usando loci de diagnóstico nuclear, es decir, los loci EF1 α-1 nDNA y nas10 nDNA.Entre ellos, 134 especímenes mostraron una concordancia del 100 % con el conjunto de datos mtDNA cox2 para la identificación de los dos taxones parentales, es decir, A. simplex (ss) (N = 107) y A. pegreffii (N = 27).De hecho, en el locus EF α-1 nDNA, se encontró que 107 individuos eran homocigotos C/C y T/T, respectivamente, en las posiciones alternativas fijas de nucleótidos 186 y 286, es decir, diagnóstico para la especie parental A. simplex (ss) .Otros 25 mostraron los genotipos homocigóticos T/T y C/C en los mismos SNP, correspondientes a la especie parental A. pegreffii26 (Supl. Fig. 1).Además, el análisis ARMS-PCR nos permitió genotipar 107 individuos como pertenecientes a A. simplex (ss) y 25 a la especie A. pegreffii.El uso combinado de los cebadores nas 10 generó un producto de PCR específico de 296 pb en A. simplex (ss), amplificando el alelo T, y un fragmento de PCR específico de 117 pb en A. pegreffii, amplificando el alelo C.Por el contrario, dos especímenes obtenidos respectivamente de una marsopa común y un delfín común de hocico corto, que en el locus cox2 del mtDNA correspondían a la especie A. pegreffii, mostraron un patrón heterocigoto en esas posiciones de diagnóstico (SNP), por lo que se ubican entre A. pegreffii y A. simplex (ss), en los dos loci nucleares EF1 α - 1 nDNA y nas10 nDNA (Supl. Fig. 1).En particular, el análisis de secuencia de estos dos especímenes reveló la aparición de un doble pico en estas posiciones de diagnóstico (es decir, 186 y 286) en EF1 α − 126. Para el análisis ARMS, dos fragmentos de PCR específicos de 296 y 117 pb se generaron en la especie con patrón heterocigoto, amplificando tanto el alelo C como el T.Este último hallazgo mostró una concordancia del 100% con el análisis de secuencia directa del gen locus nas 10 nDNA.Estos dos especímenes, que muestran un patrón heterocigoto en todos los SNP de diagnóstico de los loci EF1 α - 1 y nas10 nDNA, parecen ser el resultado de eventos de hibridación entre A. pegreffii y A. simplex (ss).Las secuencias de ADN de las especies de Anisakis actualmente identificadas se depositaron en GenBank con los siguientes números de acceso: mtDNA cox2: OM142467–OM142471 (A. pegreffii);OM142472–OM142476 (A. símplex (ss));OM14247–OM142481 (A. physeteris).EF1 α-1 ADNn: OM210033–OM210037 (A. pegreffii);OM210038 (A. símplex (ss)).El árbol filogenético de inferencia bayesiana (BI) basado en secuencias cox2 de mtDNA (Fig. 3) indicó que un total de 220 nematodos, incluidos especímenes preadultos y adultos recuperados en ballenas minke (Balaenoptera acutorostrata) y seis especies de delfínidos (delfín rayado Stenella coeruleoalba, delfín Tursiops truncatus, marsopa común Phocoena phocoena, calderón de aleta larga Globicephala melas, delfín de hocico blanco Lagenorhynchus albirostris y delfín común Delphinus delphis) y algunos preadultos encontrados en fisetéridos (cachalote Physeter macrocephalus y cachalote pigmeo Kogia breviceps), agrupados dentro de un clado bien respaldado (valor de probabilidad del 100 %), junto con una secuencia de referencia de A. simplex (ss) (DQ116426) (Fig. 3).De manera similar, un total de 96 especímenes preadultos y adultos de Anisakis agrupados en un linaje filogenético altamente respaldado (100%) representado por A. pegreffii, que también incluía una secuencia de referencia (DQ116428) de la especie del parásito (Fig. 3).Además, 157 especímenes recolectados en fisetéridos del Mar Mediterráneo y el Océano Atlántico se agruparon en un clado filogenético distinto bien respaldado formado por la especie A. physeteris (Fig. 3).Dos especímenes adultos de Anisakis recolectados de cachalote pigmeo (Kogia breviceps) en aguas del Atlántico se agruparon en un clado representado por A. brevispiculata (Fig. 3, Tabla 1).Se colocaron dos gusanos adultos recolectados de la ballena picuda de Cuvier (Ziphius cavirostris) del Mar Egeo en un clado altamente soportado que comprende secuencias de A. ziphidarum previamente depositadas en GenBank (Fig. 3, Tabla 1).Árbol filogenético del locus del gen mtDNA de cox2 construido mediante el análisis Bayesian Markov Chain Monte Carlo (MCMC) en BEAST v1.10.4109.El modelo de sustitución GTR + I + G, el reloj molecular estricto103 y el proceso de especiación de Yule se utilizaron como antecedentes del árbol, la inferencia bayesiana (BI) en secuencias del gen cox2 de mtDNA de Anisakis spp.obtenidos de cetáceos.Toxocara canis y Ascaris suum se utilizaron como grupo externo.El análisis de diversidad genética se realizó a nivel intraespecífico en A. simplex (ss), A. pegreffii y A. physeteris.No fue posible dar estimaciones de la diversidad genética de A. ziphidarum y A. brevispiculata debido al bajo número de gusanos identificados para esas especies.El análisis de diversidad génica jerárquica realizado por AMOVA (Cuadro complementario 1) indicó que en A. simplex (ss) el 92,77 % de la variación genética se expresó dentro de las poblaciones y solo el 2,52 % fue una variación entre las poblaciones de esta especie de parásito recolectada de cetáceos huéspedes de diferentes regiones. áreas geográficas del Océano Atlántico NE (Supl. Tabla 1).Se obtuvieron resultados similares para A. pegreffii, con un 97,48% de variación dentro de las poblaciones de las especies de parásitos recolectadas en cetáceos de diferentes áreas (Tabla Suplementaria 1).En el caso de A. physeteris, el 94,62 % de la variación se produjo dentro de las poblaciones (Cuadro complementario 1).Las estimaciones de la diferenciación genética (Fst) entre las poblaciones de las especies de Anisakis actualmente identificadas, como se deduce del índice de fijación, se muestran en la Tabla 2. A nivel intraespecífico, se encontró una diferenciación genética significativa (Fst) entre A. simplex (ss ) metapoblaciones del mar de Noruega en comparación con las de la costa atlántica ibérica (Fst ≈ 0.12, p < 0.00001), así como entre poblaciones de la misma especie de la costa atlántica escocesa e ibérica (Fst ≈ 0.07, p < 0.00001).Sin embargo, los individuos de A. simplex (ss) recolectados en el Mar de Noruega tenían una Fst por pares más baja en comparación con sus congéneres en aguas escocesas (Fst ≈ 0.02, p = 0.03) (Tabla 2).Comparando las especies hospedantes, se encontraron valores significativos de Fst entre las metapoblaciones de A. simplex (ss) de calderones de aleta larga (Islas Feroes y Atlántico ibérico) y las recolectadas del rorcual menor del Mar de Noruega (Fst ≈ 0.10, p < 0.00001) y delfín de hocico blanco de aguas escocesas (Fst ≈ 0.07, p < 0.00001) (datos no mostrados).Sin embargo, se registró un valor más alto de Fst por pares (Fst ≈ 0,15, p < 0,001) al comparar metapoblaciones de parásitos de la misma especie de cetáceos, es decir, la subpoblación de ballenas piloto de las Islas Feroe y la costa atlántica ibérica.Asimismo, se encontró una diferenciación genética significativa al comparar las metapoblaciones de A. simplex (ss) de delfines listados de la costa atlántica ibérica y aguas escocesas (Fst ≈ 0.09, p < 0.00001).La variación genética intraespecífica entre las metapoblaciones de A. pegreffii de los mares Adriático y Tirreno no fue significativa (Fst ≈ 0,015, p = 0,10) (Tabla 2).Por el contrario, se observó una subestructuración genética significativa al comparar las poblaciones mediterráneas (Adriático y Tirreno) de A. pegreffii con las de la costa atlántica ibérica (Fst ≈ 0,07 (p = 0,0001) y Fst ≈ 0,04 (p = 0,001), respectivamente (Cuadro 2)).Debido al bajo número de A. pegreffii encontrado en los diferentes hospedantes definitivos examinados, a excepción de los delfines listados, no fue posible comparar el valor de Fst a nivel intraespecífico por especie hospedante.Debido al bajo número de especímenes de A. physeteris obtenidos del Océano Atlántico NE, Fst a nivel intraespecífico se calculó solo para la comparación de especímenes recolectados de cachalotes varados a lo largo de la costa del Mar Adriático (de origen Mar Jónico31) y los transportados por el cachalote enano (Kogia sima) del mar Tirreno, encontrándose un nivel de diferenciación generalmente bajo y poco significativo (Fst ≈ 0.012, p = 0.03) (Tabla 2).A nivel interespecífico se observaron valores significativos de diferenciación genética entre A. simplex (ss) y A. pegreffii (Fst ≈ 0.836), siendo los valores más altos los encontrados entre A. physeteris y A. simplex (ss) (Fst ≈ 0,945) y entre A. physeteris y A. pegreffii (Fst ≈ 0,940).La red de parsimonia de haplotipos (TCS) inferida de los haplotipos cox2 de mtDNA de A. simplex (ss) (Fig. 4) muestra que la presencia de dos haplotipos principales, es decir, Hap25 y Hap48.Hap25 fue compartido por varios individuos de A. simplex (ss) recolectados en los huéspedes de cetáceos del Mar de Noruega y la costa escocesa del Océano Atlántico NE, mientras que Hap48 fue compartido principalmente por las metapoblaciones de A. simplex (ss) recolectadas en la península ibérica y escocesa. Atlántico (Fig. 4).El análisis TCS reveló la existencia de varios haplotipos únicos en la metapoblación noruega de A. simplex (ss) y en aguas del Atlántico ibérico.Además, TCS también muestra concordancia entre la agrupación de haplotipos y el origen geográfico de las muestras de endoparásitos (Fig. 4).Red TCS de A. simplex (ss) de huéspedes definitivos de cetáceos obtenida utilizando el conjunto de datos de secuencias cox2.Se informan los haplotipos (Hap1, Hap2, Hap3, etc.).Las marcas de sombreado indican mutaciones.Los tamaños de los círculos son proporcionales al número de individuos compartidos por haplotipos.El análisis TCS de los haplotipos mtDNA cox2 de A. pegreffii dio como resultado un árbol en forma de estrella (Fig. 5), siendo Hap3 el haplotipo más frecuente, compartido por todas las metapoblaciones del parásito (Fig. 5).Se observó una alta frecuencia de ciertos haplotipos únicos en los especímenes de parásitos de los huéspedes definitivos varados en la costa atlántica española y del mar Adriático en A. pegreffii (Fig. 5).Red TCS de A. pegreffii de huéspedes definitivos de cetáceos obtenida utilizando el conjunto de datos de secuencias cox2.Se informan los haplotipos (Hap1, Hap2, Hap3, etc.).Las marcas de sombreado indican mutaciones.Los tamaños de los círculos son proporcionales al número de individuos compartidos por haplotipos.Finalmente, los resultados del análisis TCS de los haplotipos de A. physeteris no mostraron agrupación por regiones geográficas (Fig. 6), sino que revelaron un patrón en forma de estrella, siendo Hap8 (probablemente el haplotipo ancestral) el haplotipo más frecuente, compartido por especímenes del mar Jónico y el mar Tirreno.El análisis también mostró la existencia de muchos haplotipos en varias áreas del mar Mediterráneo, diferenciados entre sí por algunas sustituciones (Fig. 6).La diversidad de haplotipos (h) de A. simplex (ss), estimada mediante el análisis de secuencias de mtDNA cox2, fue alta, oscilando entre 0,97 y 0,98 en metapoblaciones de parásitos de aguas ibéricas del Atlántico y del Mar de Noruega, respectivamente (Tabla 3).Se encontraron valores ligeramente más bajos en A. pegreffii (en promedio, h ≈ 0.95) y en A. physeteris (en promedio, h ≈ 0.95) (Cuadro 3).El valor promedio de la diversidad de nucleótidos dentro de las especies fue π ≈ 0.007, π ≈ 0.005 y π ≈ 0.006 en A. simplex (ss), A. pegreffii y A. physeteris, respectivamente (Cuadro 3).Red TCS de A. physeteris de huéspedes definitivos de cetáceos obtenida utilizando el conjunto de datos de secuencias cox2.Se informan los haplotipos (Hap1, Hap2, Hap3, etc.).Las marcas de sombreado indican mutaciones.Los tamaños de los círculos son proporcionales al número de individuos compartidos por haplotipos.El conocimiento de la ocurrencia y distribución de gusanos en etapa adulta del género Anisakis en sus huéspedes definitivos se basa principalmente en muestras oportunistas, obtenidas durante investigaciones de necropsia de cetáceos que fueron varados, capturados incidentalmente en artes de pesca o capturados por la caza de ballenas6,8,40.El uso de registros de varamientos es un enfoque válido y sostenible para estudiar la diversidad de especies locales de mamíferos marinos41,42,43,44,45 y para investigar la fauna de parásitos alojada por estos animales.Los eventos de varamiento pueden ocurrir por varias razones, incluidas causas naturales como enfermedades, factores ambientales y causas antropogénicas, como captura incidental, colisiones con embarcaciones, ingestión de plástico o trauma acústico46,47,48,49,50,51,52,53,54.A pesar de estas ventajas, los estudios parasitológicos en cetáceos varados se ven afectados por el estado de descomposición de los animales.También es posible que los animales en condiciones nutricionales deficientes o moribundos debido a una enfermedad o trauma no hayan buscado alimento con éxito antes de morir, lo que puede afectar la carga de parásitos demostrada en la necropsia.En este estudio, se detectaron cinco especies de Anisakis, a saber, A. simplex (ss), A. pegreffii, A. physeteris, A. brevispiculata y A. ziphidarum, de 11 especies de cetáceos varados en varios lugares a lo largo de las costas del Atlántico NE. Océano y Mar Mediterráneo (Fig. 7, Tabla 4).Además, un enfoque de genotipado multilocus basado en marcadores nucleares, aplicado a especímenes de las especies hermanas A. simplex (ss) y A. pegreffii obtenidos de huéspedes que se encuentran en un área simpátrica (aguas atlánticas ibéricas), permitió la identificación de dos genotipos heterocigóticos. , es decir, dos híbridos F1, que muestran un patrón heterocigoto en todas las posiciones de nucleótidos de diagnóstico observadas en los loci EF1 α-1 nDNA y nas 10 nDNA (Supl. Fig. 1).Este hallazgo sugiere que estos genotipos heterocigóticos muy probablemente se originaron a partir de un evento de hibridación reciente entre especímenes simpátricos de A. simplex (ss) y A. pegreffii.Ha habido informes de genotipos heterocigotos A. simplex (ss) y A. pegreffii L3 en la misma área simpátrica de varias especies de peces, incluidas especies que probablemente sean consumidas por los cetáceos estudiados26,29,55,56,57,58 ,59,60,61.Por lo tanto, los eventos de hibridación entre especies del complejo A. simplex (sl) son probablemente un fenómeno común en áreas simpátricas, como también se informó recientemente en los océanos del sur con base en un enfoque de genotipado multinuclear29.Las localidades de muestreo de Anisakis spp.en el Mar Mediterráneo y Océano Atlántico NE de los ocasionales varamientos de cetáceos, que dieron como resultado 34 ejemplares pertenecientes a 11 especies.El mapa se obtuvo de Wikimedia Commons, sin licencia (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:BlankMap-Europe-v4.png), Roke fue quien cargó no oficialmente el mapa derivado CC BY-SA 3.0.La topología del árbol filogenético, basada en las secuencias de mtDNA cox2 obtenidas (Fig. 3), diferenció a Anisakis spp.en cuatro clados bien definidos, de acuerdo con estudios previos3,23.El primer clado comprendía especies del complejo A. simplex, es decir, A. simplex (ss), A. pegreffii (y A. berlandi, que no se encuentra en el presente estudio).El segundo clado incluía A. ziphidarum y A. nascettii (este último no encontrado en el estudio actual), mientras que el tercer clado comprendía A. physeteris, A. brevispiculata y A. paggiae (este último no encontrado en el estudio actual).La conocida existencia de un patrón de especificidad de huésped en A. simplex (ss) y A. pegreffii para delfines y ballenas barbadas se ha visto respaldada por los presentes hallazgos.De hecho, las tres especies hermanas del complejo A. simplex (sl) son principalmente parásitos de las familias de cetáceos Delphinidae, Monodontidae, Phocoenidae y Balaenopteridae1,2,6,8,19,23,38,62, que parasitan a estos huéspedes en diferentes regiones geográficas. dependiendo del rango de distribución de las especies huésped y parásita3,7,30.En el estudio actual, se encontraron nematodos adultos de A. simplex (ss) y A. pegreffii en todas las especies de delfínidos que se examinaron y en un espécimen de ballena minke (Tabla 1, Figs. 1 y 2).Los parásitos adultos de estas dos especies a menudo se pueden encontrar en sintopía en los mismos huéspedes definitivos en áreas donde el área de distribución geográfica de las dos especies de parásitos se superpone26,60, como se observa en delfines mulares, delfines listados, delfines comunes y marsopas comunes que habitan en las aguas de la costa ibérica (Tabla 1, Figs. 1 y 2).Una distribución simpátrica y sintópica de estas dos especies se observó previamente en otros delfínidos y ballenas muestreadas a lo largo de las costas japonesas, como el delfín mular, el rorcual menor y el rorcual común (B. borealis)6.De manera similar, se informó una ocurrencia sintópica de A. pegreffii y A. berlandi en calderones de aleta larga de Nueva Zelanda30, así como en una orca (Orcinus orca) de aguas argentinas7.Otra observación relevante sobre la preferencia de estas especies de parásitos por ciertos huéspedes definitivos es el diferente tamaño que alcanzan los ejemplares maduros de A. simplex (sl) en misticetos, orcas y pequeños delfines6,8.Gomes et al.6, y Ugland et al.8, reportaron que los especímenes de A. simplex (ss) y A. pegreffii parecen alcanzar tamaños mayores en misticetos (ballenas sei y ballenas minke) que en Delphinidae (delfines mular, delfines piloto de aleta larga). ballenas y delfines listados).Las ballenas más grandes probablemente ofrecen un microhábitat más beneficioso para estas especies de parásitos en comparación con los delfínidos más pequeños, lo que mejora su potencial de aptitud física.Sin embargo, las implicaciones coevolutivas relacionadas con estas observaciones aún no se han aclarado.Esta investigación confirma además que los cetáceos de las familias Physeteridae (es decir, cachalotes) y Kogiidae (es decir, cachalotes enanos, K. sima, y ​​cachalotes pigmeos, K. breviceps) son los principales huéspedes definitivos de las especies incluidas en el clado 3 (Figs. 1, 2, 3), que comprende A. physeteris, A. brevispiculata y A. paggiae.Sin embargo, en el presente estudio se registró una infección muy rara de (preadulto) A. simplex (ss) y A. pegreffii en fisetéridos.Santoro et al.63 informaron la presencia de algunos especímenes inmaduros de A. pegreffii en sintopía con especímenes adultos completamente desarrollados de A. physeteris ubicados en el estómago del mismo espécimen de cachalote enano examinado en el presente estudio.También se observó previamente un caso raro de infección con A. simplex (ss) en un cachalote pigmeo del mar Caribe19, pero no se informó la etapa de desarrollo de los gusanos.Los raros casos de coinfección tanto con A. simplex (ss) como con A. pegreffii en especies de fisetéridos, principalmente en la etapa preadulta, fortalecen la hipótesis de que las infecciones con estas dos especies de parásitos en fisetéridos son poco comunes y probablemente accidentales.En este estudio, se encontró que A. physeteris es el anisáquido más común en el cachalote, representando el 97% de los especímenes identificados y el 82% de los anisákidos recuperados del cachalote enano.Estas proporciones son similares a las reportadas previamente en otros estudios39,64.La preferencia de hospedante de A. physeteris por los odontocetos pertenecientes a la familia Physeteridae, específicamente el cachalote, podría estar relacionada con la ecología y el peculiar ciclo de vida de esta especie de Anisakis.A. physeteris se ha encontrado esporádicamente en especies de peces, con bajas tasas de infección3,34,35 probablemente porque depende de especies de calamares de aguas profundas como huéspedes de transporte/paraténicos65.Los cefalópodos grandes que viven en las profundidades pueden actuar como huéspedes reservorios para esta especie de anisákido y, por lo tanto, pueden ser cruciales para completar su ciclo de vida y mantener su distribución.De hecho, todo el ciclo de vida de esta especie de parásito probablemente esté estrictamente relacionado con los ecosistemas de aguas profundas.Teniendo en cuenta el comportamiento alimentario de los cachalotes, el papel del calamar de la familia Histiotheutidae podría ser crucial en el ciclo de vida de A. physeteris, como sugiere recientemente el hallazgo de larvas de A. physeteris en Histioteuthis bonnellii en las profundidades del Mediterráneo central. Mar (Mar Tirreno)65.Por lo tanto, las especies de calamares que viven en las profundidades, que son presas comunes de las ballenas fisetéridas39,43,66,67,68,69, podrían ser un huésped paraténico/transportador adecuado para esta especie de Anisakis.Los estómagos de tres de los seis cachalotes varados a lo largo de la costa italiana del mar Adriático en 2017 mostraron una abundancia media de 706 especímenes de A. physeteris por ballena39.En los mismos estómagos, junto con esta carga de ejemplares preadultos y adultos de A. physeteris, se contaron más de 4000 picos de cefalópodos, por cada ballena.De estos picos, el 95% se clasificaron como pertenecientes a los histioteútidos (71% H. bonnellii y 24% H. reversa), mientras que el resto fueron Ancistrocheirus lesueurii (Ancistrocheiridae) y Octopoteuthis sicula (Octopoteuthidae)39.La coexistencia de preadultos y adultos de A. physeteris junto con un gran número de picos de calamar en los estómagos mencionados anteriormente indica un posible vínculo entre estas especies de calamares de aguas profundas, que probablemente portan parásitos de A. physeteris en grandes cantidades.Se informó un hallazgo similar en un cachalote varado a lo largo de la costa sureste de Italia, que fue parasitado por varios cientos de adultos A. physeteris70 y tenía el estómago lleno de picos de los calamares H. bonnellii y Ancistroteuthis lenchisteini (Mattiucci y Cipriani obs. pers. .).Podría plantearse la hipótesis de que A. pegreffii y/o A. simplex (ss) se ingirieron junto con A. physeteris.Estos últimos, al estar adaptados al microhábitat estomacal específico de los huéspedes fisetéridos, podrían ser más competitivos.Se han observado dinámicas similares en varias otras especies hermanas de nematodos anisákidos71, así como en otros parásitos helmintos72.Finalmente, dos especímenes adultos de A. ziphidarum, identificados de un zifio de Cuvier (Ziphius cavirostris) varado en la costa italiana del Mar Jónico, agrupados en el Clado 2 (Fig. 3), junto con la especie estrechamente relacionada A. nascettii .Hasta la fecha, A. ziphidarum es la única especie de anisáquido encontrada en el zifio de Cuvier del mar Mediterráneo73, mientras que A. nascettii (no encontrada en el estudio actual) se informó principalmente de zifios del género Mesoplodon4,74.Los hábitos de alimentación de los zifios sugieren que los ciclos de vida de A. ziphidarum y A. nascettii pueden involucrar principalmente a huéspedes intermedios de aguas profundas, como calamares de aguas profundas y peces mesopelágicos.De hecho, los zífidos comúnmente se alimentan de calamares pertenecientes a las familias Onychoteuthidae e Histiotheuthidae, en lugar de peces75,76,77.La asociación observada entre Anisakis spp.y varios taxones de cetáceos pueden reflejar una historia coevolutiva entre estos endoparásitos y sus anfitriones durante milenios, impulsada por adaptaciones tróficas comunes.En particular, se ha sugerido que los distintos clados formados por las especies de Anisakis “reflejan” los clados informados hasta ahora en el análisis filogenético de sus principales huéspedes definitivos2,21.Entre los impulsores que dan forma al rango geográfico de las diversas especies de Anisakis, se debe prestar especial atención a un mecanismo de dispersión que involucre tanto a sus huéspedes definitivos (cetáceos) como intermedios/paraténicos (peces y calamares).El patrón de infección de los especímenes adultos de Anisakis registrados en sus hospedadores finales (Fig. 1) concordaba en gran medida con su distribución documentada en hospedadores intermedios/paraténicos del Océano Atlántico y el Mar Mediterráneo3,35.Generalmente, en el Océano Atlántico NE, A. simplex (ss) y A. pegreffii se distribuyen a lo largo de un gradiente latitudinal1,3.obs.cienciaAdv.Parasitol.Adv.Parasitol.Parasitol.Res.Veterinario.Parasitol.Parasitol.En t.Res.Parasitol.Res.Pueden.J. Zool.Dis.aguaorg.Dis.aguaOrgano.Dis.aguaOrgano.Parasitol.Res.Li, L. et al.sist.Biol.En t.J. Parasitol.Parásitos salvajes.sp.J. Parasitol.En t.J. Parasitol.J. Parasitol.En t.J. Parasitol.Infectar.Gineta.Evol.Veterinario.En t.Pez.Res.Pez.Res.Pez.Res.J. Zool.sist.Parasitol.En t.J. Parasitol.cienciaMar. Ciencia de los mamíferos.proc.R. Soc.Mar. Ecol.prog.Ser.Mar. Ciencia de los mamíferos.Asoc.Veterinario de Nueva ZelandaMar. Ciencia de los mamíferos.Pez.Res.Mar. Ciencia de los mamíferos.Toro.Veterinario.cienciaRes.Infectar.Gineta.Evol.En t.J. Food Microbiol.En t.En t.J. Food Microbiol.Veterinario.Parasitol.Mar. Ecol.Progr.Ser.Dis.aguaOrgano.cienciaFilosofíaTrans.R. Soc.largoCentavo.Res.Toro.Res.Papilla.Parasitol.Res.Tendencias Parasitol.sist.Parasitol.sp.sist.Parasitol.Ana.Mus.Nat.hist.J. Mar. Biol.Asoc.En t.J. Parasitol.Parásitos salvajes.J. Parasitol.aplicaciónReinar.Microbiol.mol.BioquímicaParasitol.Pez.Res.Pez.Res.J. Zool.globoCambio Biol.cienciaMar. Ecol.prog.Ser.Pez.Res.ConservarGineta.emergenteInfectar.Dis.Adv.Mar Biol.J. Parasitol.J. Parasitol.Ser.Nat.J. Teor.Biol.sist.Biol.67, 901–904 (2018).mol.Ecol.recursomol.Biol.Evol.mol.Ecol.Los autores declaran no tener conflictos de intereses.Springer Nature se mantiene neutral con respecto a los reclamos jurisdiccionales en mapas publicados y afiliaciones institucionales.Las imágenes u otro material de terceros en este artículo están incluidos en la licencia Creative Commons del artículo, a menos que se indique lo contrario en una línea de crédito al material.Si el material no está incluido en la licencia Creative Commons del artículo y su uso previsto no está permitido por la regulación legal o excede el uso permitido, deberá obtener el permiso directamente del titular de los derechos de autor.Para ver una copia de esta licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.Cualquier persona con la que compartas el siguiente enlace podrá leer este contenido:Lo sentimos, un enlace para compartir no está disponible actualmente para este artículo.Proporcionado por la iniciativa de intercambio de contenido Springer Nature SharedIt